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细胞培养出现黑点是什么原因?
近日有一位实验新手提出疑问:细胞培养实验出现黑点是什么情况?是不是被污染了?此问题也是细胞培养实验的常见问题之一,我公司技术员针对此问题解析道:一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。而如果在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:1.细胞生长过...
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保存血清之一问一答
在保存血清的过程中,相信大家难免会想到一些问题,比如:温度多少合适?为什么要热灭活?等等。产品的保存方法与质量有着莫大的关系,今天我公司技术员特别将常见问题整理出分享给大家:1.问:保存血清比较好的方法是怎样的呢?答:我们建议血清应保存在-5℃至-2O℃。然而,若存放于4℃时,请勿超过一个月。若您一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2.问:如何解冻血清才不会使产品品质受损?答:我们建议您将血清从冷冻箱取出后,先置于2~8℃冰箱使之融解,然后在室...
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恒远产品技术文献:试剂-氨基甲酸乙酯引用文献
【文献标题】AstragaluspolysaccharidesaffectinsulinresistancebyregulatingthehepaticSIRT1-PGC-1α/PPARα-FGF21signalingpathwayinmaleSpragueDawleyratsundergoingcatch-upgrowth【作者】CHENGYINGGU,YIPENGZENG,ZHAOSHENGTANG,et.al【作者单位】ShanghaiPudongHospital(上海...
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酶联免疫实验常见问题解析
酶联免疫实验常见问题因灵敏度高,特异性强在生物科研上得到了广泛的认可,但对初学者而言,如不注意实验操作过程中的各个环节,可能会对终的实验结果产生比较大的影响,比如实验出现白板,显色弱灵敏度低,花板无梯度背景高等现象。下面对以上实验现象进行一一解析。1.白板现象在完成所有实验步骤进行底物TMB溶液显色后,酶标板中所有孔的颜色均为无色,即无信号呈现。出现该现象的可能原因:试剂已过保质期,不同批次稀释液交叉使用。错加漏加检测A,检测B或者底物溶液TMB。洗板或者加样过程中,酶标记物...
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上海恒远为您简述绘制标准曲线的要点
标准曲线法也称为外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定量方法,在ELISA实验中比较常用的一种分析方法。一、做标准曲线样品检测时有几个问题需要注意ELISA试剂盒1、样品的浓度等指标是根据标准曲线计算出来的,所以首先要把做标准曲线看作是比做正式实验还要重要的一件事,否则后面的实验结果无从谈起。2、设置标准曲线样品的标准浓度范围要有一个比较大的跨度,并且要能涵盖你所要检测实验样品的浓度,即样品的浓度要在标准曲线浓度范围之内,人ELISA试剂盒包括上限和下限。而对于呈S型的标准...
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ELISA实验之空白孔的设置
今天上海恒远为大家讲解ELISA实验技巧中的空白孔对照。ELISA试剂盒ELISA空白对照有几种:1.空气空白水空白:一般是用于仪器调零的,所有孔数值减掉该孔数值。2.底物空白:一般是用于防止底物弱显色所造成的读数偏高,同样所有孔数值减掉该孔数值(只加底物和终止液)3.酶空白:一般在2步法实验中使用,主要是看酶是否和板有非特异性结合的,一般不做这个。ELISA空白孔一般设一个,这是为了减除显色液的OD值。而阴性和阳性标准品比较好是设2个复孔,虽然有点浪费,但为了确保实验的可靠...
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蛋白质提纯的五种方法你都知道吗?
当科研学者们为了研究某一个蛋白质,必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来,下面就是上海恒远整理的关于蛋白质的提纯方法,只作较简要介绍供广大科研爱好者参阅。1、超速离心法此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分离,如IgM、...
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关于细胞培养这几点一定要注意了
细胞培养技术又叫细胞克隆技术。细胞培养技术指的是细胞在体外条件下的生长,在培养的过程中细胞不再形成组织(动物),今天的文章中跟大家介绍一些关于细胞培养的基础知识!一、细胞培养的基本概念体外培养(invitroculture)包括所有结构层次的培养,即:组织培养(tissueculture)、细胞培养(cellculture)和器官培养(organculture)。细胞培养(Cellculture)指从生物机体取出部分组织分散成单个细胞或直接从机体取出单个细胞,也可把体外培养细...