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技术文章

Technical articles
  • 2015

    10-21

    ELISA加样时移液枪的正确使用方法

    大家经常会讨论移液的问题,这个步骤在ELISA实验中的却是比较重要的。在加样品和加显色液的时候是定量的,产生气泡可能会对实验结果影响蛮大的。总之,掌握微量加样器加样必须注意的关键点是可以帮助您在实验中避免不必要的麻烦。1.加样不可太快,要避免加在孔壁上部,不可溅出和产生气泡。加样太快,无法保证微量加样的准确性和均一性。加在孔壁上部的非包被区,易导致非特异吸附。溅出会对邻近孔产生污染。出现气泡则反应液界面有差异。2.试剂的加入在国产试剂盒中基本上均是从滴瓶中滴加,除了要注意滴加...
  • 2015

    10-14

    实验必知:ELISA试剂盒实验条件的选择

    在ELISA试剂盒实验中,进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括:(1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗体(或抗原)的选择:将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时,要求纯度要好,吸附时一般要求PH在9.0~9.6之...
  • 2015

    10-9

    实验新手如何独立看懂ELISA实验结果

    ELISA测定按其表示测定结果的方式分为定性和定量测定两大类。定性测定只是对标本中是否含有待测抗原或抗体作出“有”或“无”的结论,分别用“阳性”和“阴性”来表示。可见定性测定通常是用于传染性病原体的抗原或抗体的测定,以判断特定病原体感染的存在与否。而定量测定则是对标本中待测抗原的多少进行量值测定,以具体数值表示。定量测定基本上是用于非病原体抗原物质的测定,如激素、细胞因子、肿瘤标志物、小分子药物等。FP,hCG、细胞因子等的定量测定。ELISA定性测定的“阴性”和“阳性”的判...
  • 2015

    9-29

    科研试剂使用注意事项

    试剂是试验、研究开发方面*的化学物质。但有些试剂会因操作有误而引起意想不到的事故。这样的试剂大体可分为具有引发火灾,爆炸的危险性;因裸露而对人体产生伤害的有害特性;以及保管中因自然分解而引发意想不到的事故的危险性。当然,有些试剂同时具有多种危险特性。因此,在使用时必须注意安全,从开封,保管,直到废弃,希望实施责任制管理。要认识到所有的试剂都具有“不被人知的危险有害性”,防止化学事故发生。●购买后,请务必确认标签上的注意事项。●做好预防颠倒,摔坏的措施和管理体制。●在使用前再次...
  • 2015

    9-24

    未使用完的96孔板试剂盒该作何处理

    ELISA试剂盒包装规格的大小取决于试剂盒里面酶标板的规格大小,常见的有96T(12孔乘以8条)跟48T(12孔乘以4条)两种。所以当您在选择ELISA试剂盒的时候考虑自己样本的收集量再做选择,以免造成浪费。也许您会想剩余没用完的板可以再保存等下次实验重新使用。我司技术却不赞同该做法,不仅仅是因为回收的板子对后面实验会造成比较大的误差。所以选购ELISA是应该考虑另外两个问题:一、经济:一块96孔板,进口的也贵不到哪去,国产的更便宜,你重复利用,这么一折腾,时间,精力以及洗板...
  • 2015

    9-22

    如何降低ELISA试剂盒背景因素的影响

    我司吴近日整理了一些相关ELISA试剂盒实验技术,今天就说说降低ELISA试剂盒背景因素的影响建议。科研人员来说ELISA实验的原理和操作步骤并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作过程中夹杂着洗涤和封闭步骤。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果操作不合理,也会很大程度上影响实验的准确度。实验结束时我们是否能获得有意义而且准确的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比,背景噪音会在很大程度上影响科研人员对结果的判断。关于如何在实验过程中降低ELISA试剂盒背景因素...
  • 2015

    9-16

    ELISA常见问题:如何确定样本的稀释倍数

    ELISA检测系统可谓是免疫学反应应用到科研生产中zui为灵敏的技术手段。可是在新老手操作过程中总是会出现或大或小的问题,常见问题有:1.同一个试剂盒,每次检测样品时,均需要带标准品吗?能否节约?2.如何确定样本的稀释倍数?3.使用标准品的稀释液来稀释吗?我司资深技术统一做出如下答复:1:严格意义上,每次检测样品都要带标准品,拟合标准曲线。原因是每次检测都要受不同条件的影响,比如人为操作,环境的变化等。2:不能节约,建议您尽量把样本同时检测3:一般来说,ELISA是不需要稀释...
  • 2015

    9-6

    上海恒远与您分享标本收集器材和注意事项

    在ELISA试剂盒实验中,标本的收集是一项很重要的步骤!在标本的收集中需用什么器材?需注意哪些事项?上海恒远生物与您分享!1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。2.血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血,高血脂标本。3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。4.标本收集后若不及时检测,请按一次使用量分装,冻存于-20℃,-70℃电冰箱内,避免反复冻融,3-6月内检测。5.如果您的样本中检测物浓度高于标准品zui高值,请根据实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以...
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