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技术文章

Technical articles

2014
9-23

根据历史起源来谈“植物组织培养应用前景”
19世纪30年代，德国植物学施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活；1902年，德国植物学家哈伯兰特细胞性的理论是植物组培的理论基础。1958年，一个振奋人心的消息从美国传向世界各地，美国植物学家斯蒂瓦特等人，用胡萝卜的嫩皮的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞的预言。植物组培的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成...
2014
9-23

根据历史起源来谈“植物组织培养应用前景
19世纪30年代，德国植物学施莱登和德国动物学家施旺创立了细胞学说，根据这一学说，如果给细胞提供和生物体内一样的条件，每个细胞都应该能够独立生活；1902年，德国植物学家哈伯兰特细胞性的理论是植物组培的理论基础。1958年，一个振奋人心的消息从美国传向世界各地，美国植物学家斯蒂瓦特等人，用胡萝卜的嫩皮的细胞进行培养，终于得到了完整植株，并且这一植株能够开花结果，证实了哈伯兰特在五十多年前关于细胞的预言。植物组培的简单过程如下：剪接植物器官或组织——经过脱分化（也叫去分化）形成...
2014
9-16

ELISA法细胞凋亡检测操作步骤
细胞凋亡的发生是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp～200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法，应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体，与核小体片段形成夹心结构，可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。常见样本以及基本操作方法：1.收集细胞，离心后，用200µl溶细胞缓冲液重新悬浮，室温下作用30min。（培养细胞的上清液、血浆和血清都可作为检测样...
2014
9-9

大鼠胰岛素ELISA试剂盒相关介绍
胰岛素是由胰岛B细胞受内源性或外源性物质如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一种蛋白质激素。胰岛素是机体内*降低血糖的激素，同时促进糖原、脂肪、蛋白质合成。大鼠胰岛素ELISA试剂盒是一种酶联免疫吸附技术，应用双抗体夹心法测定标本中大鼠胰岛素（INS）水平。用纯化的大鼠胰岛素（INS）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入胰岛素（INS），再与HRP标记的胰岛素（INS）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过*洗涤后加底物TMB显...
2014
9-3

探讨“ELISA实验重复性不佳及出现白板、阳性对照不显色”
（一）、重复性不佳可能原因及解决方法？1.样品数量多少不一，加样时间有长有短。重复某一样品时，加样时间尽可能与*次接近2.保温时间不一致，洗涤条件不一致，操作人员不一致。重复测定标本，操作条件、人员等应尽可能与上次保持一致，以排除这些因素造成的不一致的可能性。3.加样量不一致。样本稀释前应充分混匀，尽可能使用同一移液器并装紧吸嘴。。（二）出现白板，阳性对照不显色可能原因及解决方法？1.显色液变质更换新的显色液2.洗涤液配置有误请按说明书所示稀释倍数配制。3.未加酶结合物而认为...
2014
9-1

在同一条件下做WB实验为什么一张膜显影，一张膜未显影？
近期恒远经常接到客户的：同一条件下，除了测的指标不一样，为什么有张膜显影，有张未显影？？？上海恒远技术分析：在同一条件下，如果一张膜显影，一张膜未显影，可以逐一查找原因：1、你是否两张膜上都设有阳性对照？如果有，一张膜有信号，一张没信号，可能是操作过程中有问题（可能原因是（1）、你结合底物会不会有问题，即没有充分结合好，或者结合时间太短，（2）、你要确定两张膜都是用新的底物反应液，（3）、就是没有信号的膜会不会压片时间太短，如果使用仪器扫片就不存在这种问题，）所以原因比较多，...
2014
8-18

ELISA实验加样步骤不当可能会影响实验结果及解决方法
ELISA实验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床跟科研得到了广泛的应用，但操作中的各个环节操作不当可能会对实验的检测结果影响较大，如不注意，有可能导致显色不全、花板等结果。现我公司技术人员将加样操作中常出现问题的原因及解决办法总结于下，以便给同行带来一些启发，提高试验质量：加样可能原因：1)血清或血浆标本分离不好即进行加样；2)手工操作中，加样板过多造成加样后放入孵箱前等待时间过长(特别是室内温度较高时)；3)加完标本再加酶试剂时酶溅出孔外。解决办法：1)标本为血清：将血液...
2014
8-14

上海恒远为您讲解：PCR过程Z常见的三种检测模式
定量PCR（PolymeraseChainReaction）技术有广义概念和狭义概念。广义概念的定量PCR技术是指以外参或内参为标准，通过对PCR终产物的分析或PCR过程的监测，进行PCR起始模板量的定量。狭义概念的定量PCR技术（严格意义的定量PCR技术）是指用外标法（荧光杂交探针保证特异性）通过监测PCR过程（监测扩增效率）达到定量起始模板数的目的，同时以内对照有效排除假阴性结果（扩增效率为零）。PCR过程的监测有多种检测模式。zui常用的有三种检测模式：⑴SYBRGre...

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