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核酸分离与纯化的原则
材料与方法的选择(一)材料与方法的选择临床常见的标本有血液，尿液，唾液，组织及培养细胞等；核酸分离与纯化的方法非常多，如何恰当地收集与准备材料，选择适宜的分离与纯化方法是一个首要的问题。首先我们应当明确核酸的分离与纯化并不是zui终的目的，不同的实验研究与应用对核酸的产量，完整性，纯度和浓度可能有不同的要求；至于分离与纯化核酸所需的时间与成本也往往需要考虑；在不影响核酸质量的情况下，应选择安全无毒的试剂与方案。近年来，有关试剂盒的开发与自动化仪器的使用，能批量制备核酸样品，大...
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细胞凋亡的实验原理
细胞凋亡的实验原理细胞膜是一选择性的生物膜，一般的生物染料如PI等不能穿过质膜。当细胞坏死时，质膜不完整，PI就进入细胞内部，它可嵌入到DNA或RNA中，使坏死细胞着色，凋亡细胞和活细胞不着色。而一些活细胞染料由于为亲脂性物质，可跨膜进入活细胞，因而可进行活细胞染色。Hoechst33342是一种活性荧光染料且毒性较弱，它是双苯并咪唑的一种衍生物。与DNA特异结合（主要结合于A-T）碱基区），显示凋亡细胞和活细胞。凡是看到有凋亡小体的细胞都是凋亡细胞。细胞死亡根据其性质、起源...
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动物检验检疫中定量的核酸检测技术
在动物检验检疫中核酸检测技术大多数无需要求定量，所以在这只作简单介绍。核酸检测的定量化在人医临床和动物疫病基础研究中应用较多，可用于病情评估、疗效预测和观察及预后判断、疫病的病理分析，具有一定的应用价值。核酸的定量检测一般有以下两种方法。(1)定量的核酸杂交技术此类技术以分支链DNA信号放大技术(branchedDNAsignalamplificationassay，bDNA)为典型代表，bDNA技术系美国Chiron公司的，属于一种改良的核酸杂交技术，它定量的基本原理是样品...
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上海恒远告知：抗磷脂抗体检测方法
检测APLAzui敏感试验是1983年介绍的ACLA的检测，后来这种方法得到不断改进，血清、血浆均可用于分析。该方法即为酶联免疫吸附实验(ELISA)：用纯心磷脂的无水乙醇溶液(50／11)包被聚苯乙烯反应板，常规方法洗涤后，用10％的BSA封闭；加l：50稀释的待测血清，37~C孵育30rain；洗板后，再分别加入HRP标记的抗人γ(1：1500)、抗α(1：1000)、抗μ(1；8000)链的F(ab)2片段，37℃30min然后，OPD显色，加终止液。492nm波长测吸...
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ELISA常用结果判定的方法
1．定性测定(1)阳性判定值法(cut-offvalue，CO值)：一般为阴性对照的平均A值加一个常数，试剂制备严格标准化，要先计算出阳性对照A值平均数和阴性对照A值平均数。标本A值≥CO值即为阳性。(2)抑制率法：在竞争抑制法中结果可用抑制率表示。抑制率(％)＝(A阴性对照A-A待测)／阴性对照X100％,一般以抑制率≥50％为阳性2。半定量测定结果一般以滴度表示。将标本连续稀释后，进行ELISA检测，在阳性临界值以上的zui高稀释度即为该标本的“滴度”。3。定量测定即用己...
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酶标仪使用注意事项
1、工作环境酶标仪是一种精密的光学仪器，因此良好的工作环境不仅能确保其准确性和稳定性，还能够延长其使用寿命。A.仪器应放置在无强磁场和干扰电压的位置。B.仪器应放置在噪音低于40分贝的环境下。C.为延缓光学部件的老化，应避免阳光直射。D.操作环境温度应在15°C~40°C之间，环境湿度在15%~85%之间。E.操作时电压应保持稳定。F.操作环境空气清洁，避免水汽、烟尘。G.保持干燥、干净、水平的工作台面，以及足够的操作空间。2、操作注意事项许多医院在使用酶标仪之前是通过目测判...
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姬姆萨复合染液常见问题
姬姆萨复合染液常见问题：Q1:如需冷藏，冷冻保存时，具体应保存在几度（℃）的好?A1:我们推荐的冷藏保存温度为0℃～10℃之间，冷冻保存的温度在0℃以下。如未注明保存温度，原则上保存在15℃以下的阴凉处。Q2:我想知道产品的使用期限?A2:原则上来说，并没有设定试剂的使用期限或保质期限。因为试剂会因保管条件或其中混入的极微量不纯物等的原因，产生经时变化，因此很难严格断定使用期限或保质期限。Q3:为什么标有冷藏保存的产品没有用冷藏运输呢?A3:并不是说保存时的温度条件与运输时的...
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恒远生物告知：胎牛血清（FBS）的作用
胎牛血清是品质zui高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分zui少;牛血清是细胞培养中用量zui大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。1、提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。2、提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。3、有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。4、是细胞贴...
