ELISA实验成功的原因有哪些？您的实验思路是怎样的？ELISA试剂盒作为上海恒远主营且热销的产品之一，ELISA实验技术问题必然是售后服务中的一大焦点。日前上午9时，我公司展开2016酶联免疫技术交流会，会议主题也正是我今日资讯主题：ELISA实验成功的原因重在“点子”上。
    会中，我司技术总监表示：从标本的采集到实验操作步骤完毕，每一个流程都是影响实验的因素。当然，这是在试剂盒质量保证且正确保存的条件下。为什么说ELISA实验成功的原因重在“点子”上？只要每一步流程都能够达到正确的“点”上，那么您定能够做出的实验。
一、检测标本的收集：
    ①收集血液的试管应为一次性的无热原，无内毒素试管。
    ②血浆抗凝剂推荐使用EDTA。避免使用溶血，高血脂标本。
    ③标本应清澈透明，悬浮物应离心去除。
    ④标本收集后若不及时检测，请按一次使用量分装，冻存于-20℃，-70℃电冰箱内，避免反复冻融，3-6月内检测。
   在收集样本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天就进行。
  检测的样本，及时储存在4℃备用。对于隔天再检测的样本，及时分装后冻存在-20℃备用，有条件的，-70℃冻存备用。标本应避免反复冻融。
二、不断学习ELISA操作技巧：
    1.操作前应对实验的物理参数有充分的了解，如环境温度（保持在18 C～25℃）、反应孵育温度和孵育时间、洗涤的次数等，要先查看水育箱温度，ELISA试剂盒是否符合要求。
    2.正确使用加样器加样器应垂直加入标本或试剂，避免刮擦包被板底部。加样过程中避免液体外溅，血清残留在反应孔壁上，加样器吸头要清洗干净，避免污染，加样次序要与说明书一致，否则可导致结果错误，实验重复性差。
    3.手工洗板加洗液时冲击力不要太大，洗涤次数不要超过说明书推荐的洗涤次数，洗液在反应孑L内滞留的时间不宜太长。不要使洗液在孑L间窜流，造成孔问污染，导致假阴性或假阳性。
    4.要保证加液量一致 我们在使用时感觉滴瓶加液不如加样器好，滴瓶不易控制加液量不准，造成显色不统一，判断错误。
    5.显色液量不可过多 加样的工作环境不能处于阳光直射的环境下，加显色系统后要避光反应，显色液量不能过多，以免显色过强。
三、操作指南：
操作指南：固相包被→加待测样品→温育→洗涤+加酶标物→温育→洗涤→加底物→温育一加终止液→比色→判定结果
四、OD值的范围：
    在ELISAzui后步骤中OD值的范围也是有一定讲究的，不容小觑。说到OD值范围，我公司业务员在售后问题的处理过程中也常会有客户咨询其范围是多少。其实是不一定的，我们以AβELISA为例，2以上就会偏饱和，变化不容易做出来，所以一般把model组控制在0.8-1.5，而control组的话基本跟空白差不多，不到0.1。
    所以，一般情况下我们会建议先做个标曲以及样品的梯度稀释，然后选择在标曲中间位置的样品稀释度作为以后的参照稀释度。
    同时，也与使用的detector有关，detector有自己的检测范围和线性范围。如果实验室使用的仪器，说明书上说检测范围是0~4，线性范围是0~3，但我们自己的实验结果显示的线性范围是0~2OD。如果只检测空白的没有经过处理的Elisa孔，大致在0左右。
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