广泛应用在免疫学检验的各领域中的ELISA试剂盒,有着灵敏度高、特异性强、经济性较好等优点,于我公司购买还可以享受7.8折优惠。上海恒远现在就告诉您ELISA试剂盒现货的使用吧。
ELISA试剂盒的种属分类是怎样的?常见检测种属有人、大鼠、小鼠、猪等。在测定时,受检标本与固相载体表面的抗原或抗体起反应,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗体,也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。
·实验操作程序简述
1. 准备试剂,样品和标准品;
2. 加入准备好的样品和标准品,37℃反应30分钟;
3. 洗板5次,加入酶标试剂,37℃反应30分钟;
4. 洗板5次,加入显色液A、B,37℃反应10分钟;
5. 加入终止液;
6. 15分钟之内度OD值;
7. 计算。
·竞争法测抗原
小分子抗原或半抗原因缺乏可作夹心法的两个以上的位点,因此不能用双抗体夹心法进行测定,可以采用竞争法模式。其原理是标本中的抗原和一定量的酶标抗原竞争与固相抗体结合。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,zui后的显色也愈浅。小分子激素、药物等ELISA测定多用此法。
·包被的条件
包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置放置一个晚上,37℃中保温2小时被认为具有同等的包被效果。包被的zui适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。

·抗原和抗体
制备结合物时所用抗体一般 均为纯度较高的IgG,以免在与酶联结时其他杂蛋白的干扰。用亲和层析纯的抗体,这样全部酶结合物均具有特异的免疫活性,可以在高稀释度进行反应,实验结果本底浅淡。如用F(ab')2进行标记,则更可避免标本中RF的干扰。在ELISA试剂盒现货中用酶标抗原的模式不多,总的要求是抗原必须是高纯度的。
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