灏忔爣
酶联免疫试剂盒
灏忔爣
ELISA检测试剂盒
灏忔爣
elisa试剂盒价格
灏忔爣
微生物培养基
灏忔爣
血清
灏忔爣
生物试剂
灏忔爣
进口标准品对照品
灏忔爣
抗体
灏忔爣
食品检测试剂盒
灏忔爣
放免试剂盒
灏忔爣
金标试剂盒
灏忔爣
免疫化学品
灏忔爣
斯百全试剂USP
灏忔爣
其它方法测试盒
灏忔爣
农药标准品
国家标准物质网
柱状活性炭
培养基
废活性炭回收
双醚芴工厂
菌种保藏中心
丙烯酸聚氨酯漆
有机硅耐高温漆
气体探测器
植物病害检测仪
SWATH定量
产品搜索:
 
ELISA实验优化做到这些,下个大神就是您!
点击次数:1012 发布时间:2018-05-31

    ELISA试剂盒是上海恒远生物科技有限公司高度热销产品之一,拥有完善的售前、后服务,提供全程实验技术指导及免费代检测服务。在操作实验时,有些关键步骤需要操作员的细心优化。在今天的文章内容中,上海恒远为您带来ELISA实验优化做到这些,下个大神就是您!
 

一、封闭液、洗涤液及保护液的优化
    1.封闭液的优化:采用文献报道的方法进行封闭。其封闭液的组成为:10mM磷酸盐缓冲液含1%的牛血清白蛋白(BSA)。
    2.洗涤液的配制:采用文献报道的方法配制洗涤液。
    3.酶标板保护液的优化:酶标板经过封闭后在低温下仅能存放2周左右,为了延长固相酶标板上抗原的稳定性,我们增加了一步保护酶标板的程序。在10mM的磷酸盐中加入适量的糖、无关蛋白质、庆大霉素以及二价金属离子,作为酶标板保护剂,在封闭完后加入保护液于4℃冰箱中孵育放置一个晚上,同时与未做保护的酶标板进行对照,然后将保护的及未保护的酶标板置于37烘箱中放置15天,考察保护液对酶标板的稳定性的影响。

           

二、酶标抗体稀释度的优化
    抗原包被浓度为4ug/ml,将酶标抗体做系列稀释:1:100,1:200;1:300;1:400;1:500;1:600;1:1000;经孵育、洗涤后、显色终止后,用自动酶标仪分析,选择A值为1.5左右的酶标抗体稀释度为zui适工作浓度。

 

三、底物液的优化
    常用的作为酶联免疫吸附试剂有OPD和TMB系统,由于OPD有致癌的危险性以及用前需要溶解等诸多缺点,因此我们选用TMB作为底物系统,采用文献报道的方法:取适量的TMB溶解在DMSO中,然后加入适量的超纯水,配制作为底物B液;溶解适量的过氧化氢尿素于100mM磷酸-柠檬酸缓冲液中,配制作为底物A液,用前将底物A液及底物B液等体积混合。在文献报道的基础上,上海恒远适当调整了TMB的用量以及过氧化氢尿素的用量,并加入了酶促进剂,与文献报道的底物进行比较。实验方案为:将活化的辣根过氧化物酶分别作1:1000;1:10000;1:100000;1:200000;1:400000;1:800000等系列稀释,比较两种不同配方的底物的灵敏度。

 

四、抗原抗体反应时间的优化:
    抗原抗体反应会随着时间的增加,反应量也增加,但达到一定的时间后,反应即达到平衡,我们取反应10min,20min,30min,40min,50min,60min,70min,90min等8个点进行比较,以确定zuijia抗原抗体反应时间。

 

五、底物作用时间的优化
    在其它条件相同的情况下,我们取5min,10min,15min,20min,25min,30min,35min,40min,50min,60min,80min等11个时间点进行比较,确定zuijia的底物作用时间。

 

    我公司专业提供各种种属各种标本试剂盒成品的批发与零售,受到很多国内外的新老客户一致好评。购ELISA试剂盒,欢迎您致电上海恒远生物科技有限公司业务员! 

 

上海恒远生物科技有限公司 2008版权所有
电话:18221290082 传真:86-021-64881400 联系人:吴经理 地址:上海市杨浦区控江路1029弄B幢101-106室
管理登陆 ICP备:沪ICP备11004148号-3 技术支持:化工仪器网 GoogleSitemap
扫一扫访问手机站扫一扫访问手机站
访问手机站

化工仪器网

中级会员

中级会员

9

推荐收藏该企业网站