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ELISA试剂盒之酶标基本步骤是什么?
更新时间:2019-12-16 点击次数:1723

    ELISA试剂盒中的酶标用于检测未知抗原的双抗体夹心法:

    1.包被用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为110μgml。
在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml4℃过夜。次日弃去孔内溶液用洗涤缓冲液洗3次每次3分钟。(简称洗涤下同)。

    2.加样加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔阴性对照孔及阳性对照孔)。

    3.加酶标抗体于各反应孔中加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.51小时洗涤。

    4.加底物液显色于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml37℃1030分钟。

    5.终止反应于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。

    6.结果判定可于白色背景上,直接用肉眼观察结果,反应孔内颜色越深,阳性程度越强;阴性反应为无色或极浅。

    依据ELISA试剂盒检测所呈颜色的深浅以“+”、“-”号表示。也可测O·D值在ELX808酶标仪上于450nm(若以ABTS显色则410nm)处以空白对照孔调零后测各孔O·D值若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍即为阳性。

Cytological, physiological, and transcriptomic analyses of golden leaf

coloration in Ginkgo biloba L

Li et al. Horticulture Research (2018) 5:12

DOI 10.1038/s41438-018-0015-4

作者单位:扬州大学

使用产品:有机氯ELISA试剂盒

 

3. Starvation during pregnancy impairs fetal oogenesis and folliculogenesis in offspring in the mouse

Wang et al. Cell Death and Disease (2018) 9:452

DOI 10.1038/s41419-018-0492-2

作者单位:青岛农业大学

使用产品:雌二醇ELISA试剂盒

 

Tissue factor pathway inhibitor gene transfer prevents vascular smooth muscle cell proliferation by interfering with the MCP-3/CCR2 pathway

Laboratory Investigation (2015) 95, 1246–1257

© 2015 USCAP, Inc All rights reserved 0023-6837/15

作者单位:哈尔滨医科大学

使用产品:溴脱氧核苷尿嘧啶ELISA试剂盒

 

Toxicity of glyphosate in feed for weanling piglets and the mechanism of glyphosate detoxification by the liver nuclear receptor CAR/PXR pathway

Journal of Hazardous Materials,Available online 16 November 2019, 121707

doi.org/10.1016/j.jhazmat.2019.121707

作者单位:东北农业大学

使用产品:SOD, GSH-Px, GST, CAT, GSH and MDA ELISA试剂盒

 

 Enhancing methane production of anaerobic sludge digestion by

microaeration: Enzyme activity stimulation, semi-continuous reactor

validation and microbial community analysis

Bioresource Technology,Volume 289, October 2019, 121643

doi.org/10.1016/j.biortech.2019.121643

作者单位:上海电力大学

使用产品:α葡萄糖苷酶ELISA试剂盒

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