1.基本原理 
将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化（ Transformation ）。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状（感受态细菌的制备，见前）。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面，经 42℃ 短时间热冲击处理，促进细胞吸收 DNA 复合物。在丰富培养基上生长数小时后，球状细胞复原并分裂增殖。被转化的细菌中，外源基因得到表达。在选择性培养平板上，可选出所需的转化子（即含有质粒 DNA 的细菌）。钙处理的感受态细胞，一般每微克 DNA 能获得 10 5 ～ 10 6 个转化子。除化学方法转化细菌外，还有电穿孔法（ Electroporation ），其转化率可高达 10 9 ～ 10 10 个转化子 /μg 质粒 DNA 。

2.器材 

①培养皿  ②恒温培养箱

3.试剂 

① LB 培养基

②选择性 LB 琼脂培养平板（含氨苄青霉素，终浓度为 50μg/ml ）

③氨苄青霉素 100 mg/ml

④宿主细菌：经 100 mmol/L CaCl 2 处理的感受态细菌 DH5α

4.操作步骤 

①取 50 μL 大肠杆菌感受态细胞，加入适量质粒（体积不得超过 4 μL ）冰浴 30 min 后， 42℃ 热激 90 s ，马上放回冰上，冰浴 2 min ；
②加 400 μL LB 培养基，于 37℃ 摇床慢摇振荡培养 45-60 min ；
③取 50-100 μL 涂在含有氨苄青霉素（ 100 μg/mL ）的 LB 固体培养基上， 37℃ 倒置培养过夜。

上海恒远以高度的责任感和出色的产品质量为客户提供高品质的产品和实验技术解决方案。丰富的经验、优良的品质、充足的库存、准确的交货时间、竞争力的价格，所有这些保证了我们向您提供的专业优质的服务。*，所有ELISA试剂盒均以超低折扣价让利客户，全程免费技术指导，提供免费代测服务，欢迎新老客户来dian咨询详情。