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你知道样本怎么处理吗?
更新时间:2022-10-17 点击次数:523

血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置0.5-2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

血浆:EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-81000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mLPBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。最后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

细胞裂解液: 吸弃培养液,用PBS0.01 MpH 7.4)将细胞洗一遍。用细胞刮刮下细胞(不能用胰酶和EDTA 处理),加入2-5 mL PBS0.01 MpH 7.4)。悬浮细胞可省略。收集细胞悬液,41000×g离心10min,弃去培养基,用预冷的PBS润洗3次。加入适量的预冷PBS或非变性细胞裂解液(临用前加入蛋白酶抑制剂)重悬细胞,通常6孔板一个孔的细胞量需要150-250μL PBS重悬。 将样品放入-20℃或-80℃,使样品冷冻,再放室温解冻样品,反复冻融3次,使细胞充分裂解,也可将样品进行超声破碎,以达到裂解的目的。410000×g 离心10min,除去细胞碎片,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

细胞培养物上清或其它生物标本:1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。

 

样本保存和稳定性:

样本在2-8℃条件下,可以储存72h,在- 20℃或-80℃可以储存6个月及以上。样本收集后,不是一次检测完,请按一次用量分装冻存,避免反复冻融。


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