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鞭毛染色液实验过程中遇到的问题及方法
更新时间:2013-08-08 点击次数:1187

玻片处理:将玻片用洗衣粉煮沸10分钟,水洗,再用清洁液浸泡,加温10分钟,水洗,再放入95%酒精脱脂,同时取出凉干,可制成涂片.
染色液的配制:
20%的鞣酸溶液(加温溶解)2毫升
钾明矾饱和液2毫升
石碳酸饱和液5毫升
10%碱性复红无水乙醇溶液1.5毫升
将上述各液混合后放置2-3日,过滤后备用,此液使用不得超大型过5周.
染色步骤:将细菌接种在琼脂平板上,培养8-18小时,(35-37℃),用无水乙醇浸泡过的而且干燥的新玻片加一滴无菌DW,用接种环挑取菌落,置DW液面上,然后自然干燥.滴加染色液染1-2分钟,水洗干后镜检.
结果:鞭毛染成红色.
在实际鞭毛染色液胶体金实验中遇到的问题及回答:
1)超过了判读时间结果还准确吗?
答:结果不准确,应按照说明书规定的时间判读。如果到判读时间为止,结果为阴性,判读时间以后,出现淡淡的线条,可能是有色标记物持续释放造成的,但是这种结果是无效的。
2)使用冰箱保存的标本和产品,应该注意什么?
答:若标本、试剂、缓冲液冷藏后,检测前应把冷藏过包装完好的检测试剂、缓冲液放置空气中复温,冷藏或冷冻的标本检测前也应复温。如果没有与室温平衡即开始检测,空气中的水分遇冷凝集在没有复温的试剂上,导致产品受潮,可能影响测试结果。如果冰箱湿度较高,不建议开封过的筒装产品在冰箱内保存。
3)样品移行速度特别慢或无样本跑动现象(在反应窗内不见有液体在膜上流动)
答:加入的标本量或全血加稀释液的量不够:重新试验。
包装袋破损或试剂失效:重新试验。
从冷环境取出后没复温:重新试验。
诊断试剂装配不当:与供应商。
4)在反应窗内见到红色竖线
答:当样本在膜上流动时可能发生:该情况不会影响检测结果,但保证背景清晰的情况下在规定时间内读取结果。
可能使用了已溶血样本:用新鲜标本重新测试。
5)规定的结果读取时间时未见 C线?
答:加入的样本量不够:重新测试,按说明书要求加入足够的样本量。
加入的样本量太多,导致产品流动不正常:按照说明书要求滴加样本量。
样本不流动,试剂有问题:与供货商。
用血清血浆试剂检测全血:用对应的标本检测。
6)检测后出现假阳性结果
答:血清/血浆样本中含有特殊干扰物质:用另外的方法确诊检测结果。
在超过规定时间后读取结果:不要在说明书规定读数时间后读取检测结果。
7)检测后出现假阴性结果
答:样本中被检样本浓度低于检测阈值:用其它检测方法确认。
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