上海恒远公司的吴讲到：ELISA试剂盒实验过程中我们会遇到各种各样的问题，上海恒远公司吴在这跟老师们说，实验过程中遇到问题不要慌，不要紧张，我们首先要找到问题的出发点，是试剂盒的问题还是操作时漏了一个步骤没做等，您不知道可以来电询问我公司的技术人员，下面就让我司的欧阳技术来为大家讲解大鼠TNF-a免疫组化试剂盒在实验过程中遇到的问题及解析。
本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 TNF-a 单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的 TNF-a与单抗结合，加入生物素化的抗大鼠TNF-a，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，zui后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，TNF-a浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中TNF-a浓度。
检测程序
1. 加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul，将反应板充分混匀后置37℃120分钟。
2. 洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤4-6次，向滤纸上印干。
3. 每孔中加入*抗体工作液100ul。将反应板充分混匀后置37℃60分钟。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul。将反应板置37℃30分钟。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul，置37 ℃暗处反应15分钟。
8. 每孔加入100ul终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450nm处测吸光值。
大鼠TNF-a免疫组化试剂盒注意事项
1. 以上标准孔及待测样品均建议做复孔，每次测定应同时做标准曲线。
2. 洗涤过程很关键。洗涤不充分将导致度误差及OD值错误地升高。
3. 板条开封后剩余板条要再封好，保持板条干燥。
4. 本试剂盒宜置4oC冰箱保存。
5. 本试剂盒仅用于科研，不能用于临床诊断！
以上是我公司欧阳技术为各位老师讲解的大鼠TNF-a免疫组化试剂盒在实验过程的遇到的问题及解析，选择上海恒远是您zui忠实的合作伙伴！