ELISA方法被广泛用于各种抗原和抗体测定。但ELISA测定中影响因素较多,而且其操作中有一定的技术要求,在临床检验中如果处理不当,会出现一些错误结果。引起ELISA测定错误结果的原因主要有:(1)标本因素;(2)操作因素;(3)试剂因素;上海恒远就操作因素对ELISA测定的影响做如下讨论:
操作因素
1 温育的影响
温育是影响ELISA测定结果的关键因素。温育时间不够,弱阳性标本检测不出;温育温度不够,弱阳性标本也难以检出。
2 洗板的影响
洗板对ELISA测定来说也是关键步骤。洗板分手工洗板和机器洗板,一般认为机器洗板较手工洗板效果要好,关键是洗板次数的选择。洗板次数较少,造成残留,可引起假阳性结果;洗板次数过多,可造成抗原抗体结合物洗脱,造成假阴性结果。
3 显色的影响
影响显色的关键是显色温度和显色时间,有些实验室操作人员不严格按说明书操作,因为担心“花板",往往是显色时间不到就匆忙终止显色,结果造成弱阳性标本不能显色而导致假阴性发生。
4 加样的影响
加入样品、试剂及混匀时间的差异称为操作时差。操作时差在每个试验中都存在,尤为手工操作更著,对结果都会产生或大或小的影响。ELISA常用项目,例如:乙肝两对半,多是成批检测。从加*个样本到zui后一个样本,包括中间换吸管尖的工作,在这一过程中有一个时间差;加试剂及混匀也同样存在时间差,这种操作时间差会致使抗原抗体反应和酶促反应时间的不一致,而这种不一致可以直接导致误差的产生,尤其是在夏天,若不合理安排时间、尽量减少时差,将会导致假阳性或假阴性的结果出现。
以上是操作因素对ELISA检测的影响,更多信息可通过扫描下方二维码或搜索公众号hyelisakit关注上海恒远进行了解!
