做间接ELISA法测试小鼠血清中的IgE抗体，设空白对照、和阴性对照、阳性血清稀释倍数为5千、1万、10万、20万不等，用的是生物素标记的羊抗鼠IgE抗体，和亲和素的辣根过氧化物酶。可是结果除了空白对照孔没有颜色外，其余各孔全有颜色，而且OD值都相差不大，为什么？下面就由恒远为大家总结出以下几个原因！
（1） 水质被金属离子等污染；防止办法尽量使用新鲜水或蒸馏水。
（2） 洗涤不充分，样品中其它成分残留或酶残留；防止办法洗涤液应注满微孔，充分洗涤。
（3） 移液头重复使用，未洗净或消毒不*； 防止办法移液头一次性使用。
（4） 酶标板灵敏度过高。
（5） 一抗显色时间的控制等等，关于ELISA的每一步都要注意才行。
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