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法测定蛋白浓度试剂盒
更新时间:2013-08-14 点击次数:1057

一.微量法检测:(利用酶标仪进行定量分析)

  1. 将标准品工作液按0510152025μl加入到96孔板的标准品孔中,不足25μl用水补足到25μl/孔。其它孔加入适当体积样品,不足25μl加水补足到25μl

  2. 根据样品数量,按50体积试剂A加1体积试剂B(50:1)充分混匀,配置成适量Lowry工作液。Lowry试剂工作液室温2小时内稳定。

  3. 各孔加入Lowry试剂工作液125μl,振荡混匀,室温放置10分钟。

  4. 向各孔加入试剂C12.5μl,立即混匀,室温放置30分钟。

  5. 测定A500nm、A590nmA650nmA750nm500-750nm之间的波长都可以接受。

  6. 根据标准曲线计算出样品的蛋白浓度。

 常规法检测:

  1. 取7支试管,在前6管分别加入标准蛋白质250μg/ml溶液00.20.40.60.81ml,第7管加入1ml待测样品液,用双蒸水分别将每管的体积补充到1ml

  2. 向每管加入Lowry试剂工作液5ml混合,室温下放置10分钟后。

  3. 向每管加入试剂C  0.5ml,每加一管立即混匀,室温放置30分钟。

  4. 用分光光度计在波长650nm处,以第1管(不含蛋白质)对照调零,分别测定每管的光密度值。

  5. 以每管的光密度值为纵坐标,每管的蛋白质量为横坐标作图,然后根据待测样品管的光密度值在坐标上查得其蛋白质含量。

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