酶联免疫吸附试验（ELISA）自问世以来，以其敏感性高，特异性强，操作简便、安全，开创了免疫学科研的新纪元在科研方面得到了广泛的应用。但是人ELISA试剂盒在它的研究、生产及使用中常常会碰到非特异性显色问题，ELISA试剂盒特异性、检验标本中含酶标记物的干扰物，操作不当等因素都会导致这样的结果。本文就在实验过程中产生的一些原因及如何采取一些措施，消除非特异性显色作以分析。
       在ELISA中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步，应引起操作者重视。无论是手工操作还是机器操作，得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关，ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质，以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。
    每种试剂都有其*反应模式，其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高，反应时间长，会造成整板本底高，阳性率高。温育一般用湿盒或水浴，人ELISA试剂盒反应板不宜叠放，以保证各板温度都能迅速平衡，为避免蒸发，板上应加盖。