血清中沉淀物的出现有许多原因,但普遍的原因是血清中脂蛋白的变性所造成的,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。
按如下操作可避免沉淀的产生:
(1)解冻胎牛血清时,请随时将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。
(2)胎牛血清分装冻存时,须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解冻,因温度改变太大,容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。
(4)勿将胎牛血清置于37℃太久,否则血清会变得浑浊,同时血清中许多较不稳定的成份也会因此受到破坏,从而影响血清的品质。
(5)胎牛血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。
(6)若必须做胎牛血清的热灭活,请遵守56℃,30分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。
若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可加入培养基内一起过滤。不使用过滤的方法去除这些絮状沉淀物,因为它可能阻塞过过滤膜。