WB跟ELISA实验应该如何做选择
更新时间:2015-11-19 点击次数:1752
常有医院科研者收集临床血清样本检测某种细胞因子的表达情况,在选择实验方法时难以取舍。WB和ELISA不知道该选择哪种方法,哪种方法的实验结果更为可靠?有些人说ELISA自己包被抗体的话会比较麻烦,WB相比更加科学,发表文献时容易被接纳。但是血清中没有内参可以选择。是不是ELISA实验操作要简单很多,那么又如何来解决这样的一个问题呢?上海恒远生物科技有限公司资深技术给您解答这个疑惑。
一、WB和ELISA的敏感性有所区别。虽然前者用ECL显色敏感度可达pg级,但不同的样品来源和抗体的质量,不能保证每次都到这个级别;而ELISA可以达到ng级。也就是说ELISA更适于丰度低的蛋白检测。而且由于ELISA检测所用的样品少,也适用于样品来源有限的蛋白浓度检测。
二、在定量方面,ELISA一般用于定性,定量也可, WB可以做到半定量。
三、ELISA不如WB的特异性好。
四、关于血清内因子的检测,如果WB检得出就不要用ELISA。血清内参的问题,在ELISA里也一样存在。操作来说ELISA当然简单,但由于两种方法各有优点,不能全面相互代替。